Волков Е.М., Фросин В.Н.

Экспериментальные методы в клеточной биологии: Учебное пособие для студентов КГМУ – Казань: КГМУ, 2008. – 27 с.

В учебном пособии дано краткое изложение традиционных и новейших методов изучения клеток и организмов. Представлен широкий спектр методов, позволяющий сформировать у студентов целостную картину изучения организма на разных уровнях организации: молекулярно-генетическом, клеточном, тканевом и органном.

Учебное пособие предназначено для студентов первого курса КГМУ, обучающихся по дисциплине “Биология”.

© Казанский государственный медицинский

    университет, 2008

© Е.М.Волков, В.Н.Фросин, 2008

Оглавление

  Введение                                                                                                                   4

  1. Научный метод познания                                                                                    4

2. Микроскопия                                                                                                         6

2.1. Световая микроскопия                                                                                      6

2.1.1. Фазово-контрастная и  интерференционная микроскопия                       7

2.1.2. Микроскопия в темном поле                                                                     8

2.1.3. Флуоресцентная микроскопия                                                                  8

2.2. Просвечивающая и сканирующая электронная микроскопия                         9

3. Рентгеноструктурный анализ                                                                           10

4. Фракционирование клеточного содержимого                                               11

4.1.Дифференциальное центрифугирование                                                         11

4.2.Центрифугирование в градиенте плотности                                                   13

4.3. Хроматография                                                                                               13

4.4. Электрофорез                                                                                                 14

5. Методы выявления химических соединений в клетках                              15

5.1. Цито- и гистохимические методы окрашивания                                           15

5.1.1. Выявление ферментов                                                                            15

5.2. Цитофотометрические методы                                                                      16

5.3. Иммуноцитохимические  методы                                                                  16

5.4. Радиоавтографические методы.                                                                    18

6. Технология рекомбинантных ДНК                                                                 19

6.1. Специфическое расщепление ДНК рестриктазами                                       19

6.2. Секвенирование ДНК                                                                                    20

6.3. Гибридизация нуклеиновых кислот                                                              20

6.4. Клонирование ДНК                                                                                       21

6.5. Генетическая инженерия                                                                               21

7. Исследование живых клеток                                                                           22

7.1. Культура тканей                                                                                            22

7.2. Микрохирургия клеток                                                                                 22

7.3. Отведение электрических сигналов                                                             23

7.4. Микроинъекции в клетки                                                                             24

7.5. Ядерный магнитный резонанс                                                                     24

7.6. Оптические методы                                                                                      25

   Заключение                                                                                                        25

Ключевые термины и понятия                                                                        26

Литература                                                                                                          27