Диафрагма представляет собой систему из подвижных металлических пластинок, веерообразно налегающих друг на друга и расположенных внутри металлического корпуса. Она служит для регулирования величины проходящего через нее потока световых лучей. Перемещением рычага диафрагмы можно сдвигать и раздвигать пластинки, изменяя диаметр отверстия между пластинками и тем самым регулируя освещенность поля зрения микроскопа.